Araştırmalar

Bu çalışmada serviks kanseri tedavisinde kemoterapi kaynaklı akut gastroenteritte hidrolize pirinç kepeğinin (HPK) radyoprotektif etkisi araştırılmıştır. Bu plasebo kontrollü çift-kör çalışma, kemoradyoterapinin akut faz gastrointestinal yan etkilerini hafifletmede hidrolize pirinç kepeğinin kolit önleyici etkilerini araştırmak üzere tasarlanmıştır. Çalışmaya 20 hasta dahil edilmiştir (HPK grubunda 10, kontrol grubunda 10). Kontrol grubundaki hastalara HPK grubundakilerle aynı kemoradyoterapi uygulanmış, ancak HPK yerine plasebo almışlardır. İshal yan etki değerlendirme skoru HPK grubunda kontrol grubuna göre düşük bulunmuş ve oral HPK alımı ile ishal semptomlarında azalma eğilimi gözlenmiştir. Ek olarak, bağırsak düzenleyicileri ve antidiyare ajanların uygulanmasında anlamlı bir fark gözlenmemiş, ancak yine de değerlendirme puanı HPK grubunda kontrol grubundan daha düşük bulunmuş ve ishal semptomları oral HPK kullanımı ile hafiflemiştir. Sonuçlar hidrolize pirinç kepeğinin kemoradyoterapinin akut faz gastrointestinal bir yan etkisi olan ishali hafifletebileceğini göstermektedir.

Uzak metastazın eşlik ettiği terminal dönem pankreas kanseri olan, bu nedenle radikal cerrahi için uygun olmayan bir hasta, biyolojik savunma etkisi olduğu, kan dolaşımını hızandırdığı, besinler ve ilaçların taşınmasını (taşıyıcı etkisi) arttıran π suyu içerdiği bildirilen, bunlara ek olarak toksik kemoterapötiklerin etkisini azaltarak biyolojik işlevlerin ve yaşam kalitesinin (QOL) sürdürülebilmesini sağlayan pirinç kepeği arabinoksilan türevi ile tedavi edlmiştir. Sonuç olarak biyolojik fonksiyonlardagelime ve kendiliğinden tedavi gücü gibi tatmin edici terapötik etkiler elde edilmiştir.

Dendritik hücreler (DC'ler) ve doğal öldürücü (Natural Killer- NK) hücreler, tümör büyümesini kontrol eden doğuştan gelen bağışıklığın merkezi bileşenleridir. Bazı anti-miyelom ilaçları doğal immün yanıtı hedefleyerek terapötik etki göstermektedir. Ek olarak, hem hücresel hem de humoral bağışıklığı etkin bir şekilde modüle eden yeni doğal bileşikler geliştirilmiştir. MGN-3, doğal öldürücü hücrelerin (NK) aktivatörü, apoptoz ve sitokin üretiminin uyarıcısı ve in vitro dendritik hücre olgunlaşması ve farklılaşması modülatörü olarak bilinir. MGN-3'ün 48 multipl miyelom hastasında doğal immün sistem parametreleri üzerindeki etkilerini incelemek için randomize, plasebo kontrollü bir çalışma yaptık. Periferik kan örneklerinin immünofenotipik analizini yaptık, NK hücre aktivitesini belirledik ve tedavi öncesi ve tedavi sırasında 3 aylık plazma sitokin profillerini değerlendirdik. Sonuçlar, MGN-3 ile tedavi edilen hastalarda NK aktivitesinde plasebo grubuna kıyasla belirgin bir artış, periferik kanda artan miyeloid dendritik hücre seviyeleri ve artmış Tip-1 T yardımcı hücre ilişkili sitokin konsantrasyonları göstermiştir. Bu çalışma, MGN-3'ün Multiple Myeloma hastalarında doğal immüniteyi aktifleştiren immünolojiyle ilişkili bir ürün olabileceğini, klinik etkinliği göstermek için daha fazla çalışma yapılmasını hak ettiğini göstermektedir.

Pirinç kepeğinden elde edilen arabinoksilanın modifiye edilmiş bir formu olan MGN-3 / Biobran (Bi.Bran), güçlü bir biyolojik yanıt iyileştiricidir (BRM). Önceki çalışmalarımız MGN-3'ün insan lösemi hücrelerini ölüm reseptörüne [CD95] bağlı apoptozise duyarlı hale getirdiğini gösterdi (Ghoneum M, Gollapudi S.] MGN-3, insan T hücreli lösemi hücrelerini CD-95 ölüm reseptörü aracılı apoptozise duyarlı hale getirdi. Cancer Lett 2003; 201: 41-9). Bu çalışmada, MGN-3'ün insanda meme kanseri hücrelerinde (BCC'ler) kemo-duyarlılık aktivitesinde meyadan getirdiği değişiklikleri in vitro olarak değerlendirdik. Yöntemler: BCC'ler (MCF-7 ve HCC70 hücreleri), seçilen MGN-3 konsantrasyonlarının varlığında veya yokluğunda farklı konsantrasyonlarda 3 gün boyunca (100). –1000 μg / ml) daunorubisin (DNR) (1x109 ila 1x106 M) ile kültürlendi. Kanser hücresi sağkalımı MTT tahlili ile belirlendi; ilaç birikimi, flow sitometri ile belirlendi. Sonuçlar: MGN-3 ile muamele edilmis BCC’ler ile sadece DNR ile muamele edilmiş kıyaslandığında, MGN-3 BCC'lerin DNR'ye duyarlılığını arttırmıştır (MCF-7 için 5.5 kat ve HCC70 hücreleri için 2.5 kat). MGN-3'ün duyarlılaştırıcı etkisi, kanser hücrelerinde artmış DNR birikimi ile ilişkili bulunmuştur. Sonuç: verilerimiz, MGN-3'ün etkili bir kemo-duyarlılaştırıcı olduğunu ve meme kanseri tedavisi için potansiyel yeni bir yardımcı madde olabileceğini göstermektedir.

Shiitake mantarlarından elde edilen bir ekstrakt aracılığı ile pirinç kepeğinden enzimatik olarak elde edilen arabinoksilan (MGN-3), NK hücre aktivitesini artıran ve geleneksel kemoterapötik ajanların aktivitesini kuvvetlendiren etkili bir biyolojik yanıt modifiye edicidir. Bu çalışmada, insan lösemik HUT 78 hücre hattında ölüm reseptörü aracılı apoptoz üzerinde MGN-3' ün etkisini araştırılmıştır. HUT 78 hücreleri, MGN-3 ile ön işleme tabi tutulmuş ve daha sonra ölüm reseptörüne (Fas, CD95) karşı agonistik antikorla inkübe edilmiştir. Apoptozis, FACScan kullanılarak propidium iyodür tekniği ile belirlenmiştir. Kaspaz-3, Kaspaz-8 ve Kaspaz-9'un aktivasyonu, flow sitometri ile belirlenmiş, mitokondriyal membran potansiyeli FACScan kullanılarak DIOC (6) boyası ile ölçülmüştür. CD95 ve Bcl-2 ekspresyonu, flow sitometri ile ölçülmüştür. Sonuçlarda MGN-3’ün anti-CD95 antikoru ile indüklenen apoptozu doza bağlı bir şekilde artırdığı tespit edilmiştir. Artan hücre ölümü, mitokondriyal membran potansiyelinin artmış depolarizasyonu ve Kaspaz-3, Kaspaz-8 ve Kaspaz-9'un artmış aktivasyonu ile ilişkilendirilmiştir. MGN-3 uygulaması CD95'in ekspresyon seviyesi üzerinde bir etki göstermemiş ancak Bcl-2'nin down regülasyonuna neden olmuştur. Bu sonuçlar MGN-3'ün kanser hücrelerinin ölüm ligandlarının aracılık ettiği apoptoza maruz kalma duyarlılığını arttırdığını ve anti-kanser aktiviteleri için uygun olabileceğini göstermektedir.

Bu çalışmada hepatoselüler karsinom hastalarının tedavisinde pirinç kepeği arabinoksilanının (MGN-3) girişimsel tedavi (IT) etkinliğine katkısı incelenmiştir. Hastalar ve Metod: Çalışmaya hepatoselüler karsinomlu toplam altmış sekiz hasta (evre I ve II) katıldı. Hastalar IT (30 hasta, kontrol grubu) veya IT + MGN-3'ü (38 hasta) alacak şekilde randomize edildi ve bilgisayar tabanlı bir randomizasyon listesi kullanılarak rastgele iki gruba ayrıldı. Hastalar ve araştırmacıların araştırmadaki hastaların deney ya da kontrol grubunda olmasını bilmesi önlenmiştir. IT, transarterial yağlı kemoembolizasyonu (TOCE) veya TOCE ve perkütan etanol enjeksiyon işleminin (PEIT) bir kombinasyonunu içeriyordu. Bulgular: (i) kontrol grubuyla %46,7 (14/30) karşılaştırıldığında IT+MGN-3 grubunda daha düşük hastalık nüksü %31,6 (12/38); (ii) ikinci yıldan sonra kontrol grubuna göre (%6,7) MGN-3 gurubunda daha yüksek sağkalım (%35); (iii) alfa-fetoprotein seviyesinde kontrol grubunda anlamlı değişiklik görülmezken, MGN-3 grubunda başlangıç değerine kıyasla %38'lik bir düşüş (p = 0.0001); ve (iv) kontrol grubunun aksine, MGN-3 grubunda tümör hacminde önemli bir azalma olduğunu göstermiştir. Sonuçlar her bir IT yöntemine göre analiz edildiğinde, MGN-3 + IT alt grupları tedaviye IT alt gruplarından daha fazla yanıt verdi. Bununla birlikte, MGN-3 + TOCE + PEIT alt grubundaki hastalar, MGN-3 + TOCE alt grubuna göre AFP seviyelerinde daha fazla azalma ve grubundan daha uzun sağkalım göstermiştir. Sonuç: MGN-3, girişimsel tedavilerle birlikte hepatoselüler karsinom tedavisinde yararlı olabilir ve bu doğrultuda daha fazla klinik çalışma ile araştırılmayı hak etmektedir.

Bu çalışma, MGN-3 uygulamasının cerrahi sonrası III-IV aşamalarının sonlarında 205 ilerleyici ve kısmen metastazlı kanser hastaları için sağkalım ve yaşam kalitesi üzerinde etkiye sahip olup olmadığını göstermek amacıyla yapılmıştır. MGN-3, bir pirinç kepeği arabinoksilan türevidir ve immünomodülasyon aktivitesine sahip olduğu bilinmektedir. Bu klinik araştırmaya katılanlar, kliniğimizde tamamlayıcı alternatif ilaçlar (“Konvansiyonel Olmayan Tedavi” olarak adlandırıyoruz) ile tedavi edilen hastanelerdeki hastalar ve daha az yan etkisi olan antikanser ilaçlarıdır. 6 ay boyunca hastanede yatan 205 hasta, iki gruba ayrıldı, yani standart tamamlayıcı alternatif ilaçlarımızla tedavi edilen 109 hasta (kontrol grubu) ve ayrıca bir yıl boyunca MGN-3 (MGN-3 grubu) verilen 96 hasta vardı. Tüm hastalarda immünoparametrelerin varyasyonunun bir göstergesi olarak doğal öldürücü hücre aktivitesi (natural killer-NK) ölçüldü. Aynı zamanda, hastaların yaşam kalitesi de kontrol edildi. Ameliyat sonrası hastaların NK hücre aktiviteleri ortalama olarak düşüktü; bununla birlikte, MGN-3'ün uygulanmasıyla, NK aktivitesinin arttığı ve sağkalım oranının arttığı; hasta NK aktivitesi arttıkça, sağkalımın da arttığı gözlendi. Yukarıdaki bulgular, NK aktivitesinin, ilerleyici kanserlerin patolojik bir indeksi olarak kullanılabileceğini göstermektedir. MGN-3 uygulamasında yaşam kalitesi iyileşmesi de gözlendi.

Pirinç kepeğinin Shiitake mantari ile reaksiyonu sonucu elde edile Arabinoksilanın (MGN-3), in vivo ve in vitro olarak insan doğal öldürücü hücre (Natural Killer-NK) aktivitesi artırıcı etkisi incelendi. Yirmi dört kişiye 2 ay boyunca oral olarak üç farklı konsantrasyonda (15, 30 ve 45 mg / kg / gün) MGN-3 verildi. K562 ve Raji tümör hücrelerine karşı periferik kan lenfosit-NK hücre aktivitesi, tedavinin 1. haftası, 1. ayı ve 2. ayında 51Cr salma testi ile ölçüldü ve sonuçlar başlangıç NK hücre aktivitesi ile karşılaştırıldı. MGN-3 kullanılan tüm konsantrasyonlarda K562 tümör hücrelerine karşı NK aktivitesini artırdı. Doza bağlı bir şekilde, MGN-3, 15 mg / kg / gün'de, tedaviden 1 ay sonra NK aktivitesini arttırırken (kontrol değerinin iki katı), 30 mg / kg / gün'de tedavi bitiminden 1 hafta sonrasında NK aktivitesinin anlamlı indüksiyonu (kontrol değerinin üç katı) tespit edildi. NK hücre aktivitesi kullanım sürdürüldüğünde artmaya devam etti ve başlangıcın 2. ayında (tedavi bitiminde) zirve yaptı (beş kat artış). Konsantrasyonun 45 mg / kg / gün’e yükseltilmesi NK aktivitesinde benzer eğilimler göstermiştir, ancak değerler 30 mg / kg / gün'den daha yüksektir. Tedavinin kesilmesi ile NK aktivitesi azalmış ve 1 ay sonra temel değere (14 litik ünite) geri dönmüştür. Artmış NK aktivitesi, dirençli Raji tümör hücre hattına karşı sitotoksik reaktivitede bir artış ile ilişkilendirildi. 45 mg / kg / gün dozda uygulanan MGN-3, kullanımın 1. haftasında NK hücre aktivitesinde belirgin artış göstermiş (sekiz kat) ve kullanım süresinin de sonu olan 2. ay sonunda zirve yapmıştır (27 kat artış). Periferik kan lenfositlerinin (PBL) 16 saat boyunca MGN-3 ile kültürü sonucunda NK aktivitesinde kontrol değerine göre 1,3 ila 1,5 kat artış ölçülmüştür. MGN-3'ün NK aktivitesini arttırdığı mekanizma da araştırılmıştır; başlangıç değerine kıyasla MGN-3 ile aktive edilmiş NK hücrelerin farklılaşma kümesinde (CD) 16+ ve CD56+ CD3- değişiklik görülmemiş, NK hücrelerin tümör hücresinde hedeflere bağlanma kapasitesinde başlangıç değerine kıyasla dört kat artış tespit edilmiş, 25-100 μg / ml konsantrasyonlarında MGN-3 ile kültüre edilen periferik kan lenfositlerinin interferon-γ (340-580 pg / ml) üretiminde önemli bir artış ölçülmüştür. Bu nedenle, MGN-3; NK hücre aktivitesinin artmasını sağlayan güçlü bir immünomodülatör olarak etki eder. MGN-3, belirgin yan etkiler göstermemesiyle, kansere karşı olası terapötik etkilere sahip yeni bir biyolojik yanıt iyileştirici (BRM) olarak kullanılabilir.

Materyal ve yöntem: 50 Meme kanseri hastası randomize olarak iki gruba ayrılmıştır. Grup A hastalarına kemoterapiden 1 hafta önce ve 1 hafta sonra olmak üzere günde 3 gram dozda oral Biobran MGN-3 verilmiştir. Grup B hastaları yalnızca kemoterapi almıştır. Toplam 6 kemoterapi kürü verilmiştir. Çalışma boyunca hastalara herhangi bir multivitamin veya gıda takviyesi verilmemiştir. Kemoterapi kaynaklı yan etkiler (yorgunluk, anoreksiya, kusma ve saç kaybı) her kemoterapi döngüsü başlangıcında bir anketle değerlendirilmiştir. Her kemoterapi döngüsü başlangıcında kilo ölçümleri yapılmıştır. Beyaz kan hücreleri her kemoterapi uygulamasından hemen önce ve 1 hafta sonrasında total kan sayımı ile ölçülmüştür.

Sonuçlar: 6 aylık süre içinde Nishtar Hastanesi (Multan) Radyoterapi bölümüne 50 hasta kayıt olmuştur. Biobran (Bi.Bran) kullanılan Grup A hastalarında yorgunluk ve anoreksiyada belirgin azalma olmuştur.Grup A’da yer alan 20 hasta (%80) iştah açıcı herhangi bir multivitamin kullanmadan beslenmede artış ve yorgunluğun kaybolmasını hissetmiştir. Ancak Grup B hastaları 3 hasta (%12) dışında anoreksiyaya bağlı iştah kaybı sebebiyle iştah artırıcı talebinde bulunmuştur. Grup B hastalarınından 15 hasta (%60) herhangi bir anti-emetik ihtiyacı hissetmezken; tüm Grup B hastaları (%100) kemoterapi sonrası bulantı yaşamıştır. Grup A hastalarında saç kaybı oranı %28 iken bu durum Grup B hastalarının tümünde (%100) görülmüştür.

SONUÇLAR: Bu çalışma Biobran’ın immün sistemin optimizasyonuna yardım etmesinin yanında, kemoterapi yan etkilerini minimize ederek ve yaşam kalitesini iyileştirerek tedavi şansını maksimize ettiğini de göstermiştir.

Pirinç kepeği modifiye arabinoksilanı MGN-3 / Bi.Bran'ın T ve B hücreleri gibi immün sistemin farklı kollarının uyarılmasıyla ortaya konan güçlü bir biyolojik yanıt modifiye edici (BRM) olduğu gösterilmiştir; ancak, makrofajlar üzerindeki etkisi henüz çalışılmamıştır. MGN-3'ün makrofaj fonksiyonu üzerindeki etkileri 3 model kullanılarak in vitro olarak incelendi: insan makrofaj hücre hattı U937, murin makrofaj hücre hattı RAW264.7 ve murin periton makrofajları (P-M phi). MGN-3 ile muamele, makrofajların mayaya bağlanma ve fagositoz oranlarında artışla sonuçlanmıştır. Etki makrofajın tipine ve uygulanan MGN-3'ün dozuna bağlıdır. Makrofajlar ayrıca MGN-3 ile muamele sonrası yayılma kabiliyetlerinde gelişme göstermiştir. Sonuçlar ayrıca MGN-3'ün doza bağlı bir şekilde (1, 10,100 mikrogram / ml), yüksek düzeyde sitokin üretimi sağladığını gösterdi: TNF-alfa; ve IL-6. Ek olarak, MGN-3 nitrik oksit (NO) üretimini önemli ölçüde arttırdı. Bu veriler, MGN-3'ün makrofaj ile fagositik fonksiyonun güçlü bir indükleyicisi olduğunu göstermektedir ve MGN-3'ün mikrobiyal enfeksiyonla mücadelede yararlı bir ajan olduğunu göstermektedir.

Hastalar: Çalışma 32 kanser hastası ile non-randomize olarak yürütülmüştür. Hastalar; prostat (10), mem (12), multiple myleoma (5) ve lösemi gibi çeşitli malinitlere sahiptir. Hastalar daha önce cerrahi, kemoterapi ve radyoterapi gibi konvansiyonel tedavileri almıştır.

Materyal: MGN-3; Shiitake mantarından elde edilen bir ekstre ile enzimatik olarak pirinç kepeğinden elde edilen arabinoksilandır. MGN-3 bir polisakkarittir ve ticari olarak Biobran (Daiwa Pharm., Co., Ltd., Tokyo, Japonya) ismiyle bilinmektedir.

Yöntem: MGN-3 hastalara 1 ay boyunca günde 3 gram (oral) olarak verilmiştir. Tümör ilişkili antijenler tedavi başlangıcından önce ve tedavi bitiminden 1 ay sonra ölçülmüştür. NK Hücre aktivitesi tedavinin 1. Haftasında ve tedavi bitiminden 1 hafta sonra ölçülmüştür. T ve B hücrelerin farklı mitojenlere yanıt olarak proliferasyonundaki artış ise tedavi öncesi ve tedaviden 1 ay sonra ölçülmüştür.

Sonuçlar: Tedavi öncesinde hastaların NK hücre aktivitesinin düşük olduğu tespit edilmiştir. MGN-3 ile tedavi hastalarda NK hücre aktivitesinde değişen oranlarda 10 kata kadar belirgin artış sağlamıştır. Ayrıca MGN-3 tedavisi ile B hücre ve T hücre proliferasyonunda artış görülmüştür. MGN-3 etki mekanizması NK hücre granülasyonunda artış ve ardından sitokin üretimindeki değişiklikler ile açıklanmıştır. Çalışma sonucunda MGN-3’ün immünostimülasyon sağladığı belirtilmiştir.